resumen

En noviembre de 2017, se observaron cancros verticales en el tronco de 120 árboles que crecían en una plantación de álamos híbridos (Populus × euramericana) de 12 hectáreas en el distrito de Santarém (Portugal), sugiriendo una enfermedad bacteriana. Los árboles habían sido importados de Francia y plantados en 2011. La corteza agrietada verticalmente presentaba una masa cremosa blanquecina delimitada por exudados de color marrón oscuro. Bajo el microscopio, se encontró que la masa cremosa estaba compuesta por un gran número de individuos del nematodo bacteriófago de vida libre Panagrellus redivivus, como también informaron Tóth et al. (2013), quien sugirió que un gran número de bacterias están presentes en el cáncer de la corteza. Las muestras de cancros y exudados se maceraron y los extractos se colocaron en placas en el medio B de King. Los cultivos produjeron aislamientos bacterianos que mostraban colonias de color blanco marfil, brillantes, redondas, ligeramente convexas y no fluorescentes bajo luz UV. Se seleccionaron nueve aislamientos y se caracterizaron además por fenotípicos (datos bioquímicos, perfiles de ácidos grasos, utilización de fuentes de carbono por las placas de prueba Biolog GEN III y API 20E) y análisis filogenético. También se incluyó una cepa de Lonsdalea populi para comparación. Las colonias fueron gramnegativas, anaerobias facultativas, levan y esculina con hidrólisis positiva, pero no tenían citocromo c oxidasa o actividad de ureasa, y no indujeron una respuesta de hipersensibilidad en las plantas de tabaco. La sintomatología en los álamos afectados y los resultados de los análisis fenotípicos de los aislamientos fueron similares a los informados para L. populi (Berruete et al. 2016; Li et al. 2014, 2017; Tóth et al. 2013). Las secuencias parciales del gen 16S rDNA y los genes de mantenimiento gapA, atpD, gyrB e infB mostraron una identidad del 99-100% con los aislamientos de L. populi disponibles en la base de datos GenBank. El árbol filogenético de unión al Vecino, inferido por el CIPRES Science Gateway después de la alineación en línea por el programa MAFFT versión 7 de 16S rDNA y las secuencias de genes de mantenimiento, identificaron los aislamientos como L. populi. Las secuencias de dos aislamientos representativos (EFA-L5 y EFA-L6) de este estudio se enviaron a GenBank (números de acceso MH469711 y MH469712 para el gen 16S rRNA, MH496625 y MH496626 para gapA, MH559348 y MH559349 para atpD, MH824634 y MH824635) MH899112 y MH899113 para infB). La patogenicidad de los aislamientos de EFA-L5 y EFA-L6 se probó en plantas de vivero de P. × euramericana 'I-214'. Para cada aislado bacteriano, se preparó una suspensión en agua como inóculo (107 UFC / ml). Cinco plantas fueron inoculadas con EFA-L5 y otras 5 con EFA-L6. En cada planta inoculada, se hicieron dos incisiones en el tronco y se aplicaron 100 µl de la suspensión bacteriana correspondiente en cada incisión. Se aplicó agua destilada estéril en incisiones similares hechas en el tronco de cinco plantas de control. Todas las plantas se colocaron en una cámara de crecimiento al 85-90% de humedad y 22 ± 3ºC. Se observó un área de necrosis acuosa en todas las plantas inoculadas 7 días después de la inoculación, pero no en las plantas de control. Después de tres meses, se observó el deterioro y la muerte de la mayoría de las plantas inoculadas. L. populi se volvió a aislar de plantas sintomáticas, cumpliendo así los postulados de Koch. Se ha informado de que L. populi causó la enfermedad del cancro de la corteza en álamo en Hungría, China y España (Berruete et al. 2016; Li et al. 2014; Tóth et al. 2013). Por lo que sabemos, este es el primer informe de L. populi sobre el álamo en Portugal. Se necesita más investigación para conocer la distribución de la enfermedad del cáncer de la corteza en este país, ya que podría tener un impacto económico significativo en las plantaciones de álamos.